• Главная
  • Карта сайта

Биология и природа вокруг нас ...

Главное меню

  • На главную
  • Гидросфера и атмосфера Земли
  • Функциональная асимметрия мозга
  • Строение клеток растений
  • Анатомия человека
  • Человек как биологический вид
  • Процесс антропогенеза
  • Естествознание в системе наук

Выделение РНК-лигазы фага Т4

Очистку РНК-лигазы проводили в две стадии:

1) Выделение на колонке с Ni2+-NTA-агарозой проводили аналогично вышеописанному случаю. Элюировали белки градиентом концентрации имидазола ( 5мМ- 1М). Но в этом случае не удалось избежать примесей других белков, в связи с чем пришлось проводить дополнительную стадию очистки. Результат хроматографии представлен на рис.13.

2) Очистка на колонке с голубой агарозой (рис. 13). Этот носитель служит для выделения АТФ-связывающих белков, одним из которых является РНК-лигаза. Элюирование проводили градиентом концентрации 0-2 M KCl. Фермент элюировался в диапазоне концентраций KCl от 200 до 800 мМ.

В итоге получили 5,2 мг фермента с одного грамма клеточной биомассы.

Copyright © 2013 - Все права защищены