Спектрофотометрический метод определения содержания зеленых пигментов
Содержание зеленых пигментов определяли спектрофотометрическим методом по молярным коэффициентам экстинции.
Для этого, определенную навеску сырого растительного материала заливали 5 мл.96% этанола и ставили на водяную баню (t=70 ºC) на 30 минут. После бани, полученный раствор помещали в холодильник на ночь для получения более полной экстракции хлорофилла [8].
Определение оптической плотности экстракта осуществляли на спектрофотометре (СФ-16), обладающем достаточной разрешающей способностью. Для вычисления концентрации пигментов, использовали формулы:
Ca = [13,7× (D665-D750) - 5.7× (D649 - D750)] ×V/m
Cb= [25.8× (D649-D750) - 7.6× (D665 - D750)] ×V/m,
где концентрации Са - концентрация хлорофилла а (мкг/мл), Сb - концентрация хлорофилла b (мкг/мл), D - оптическая плотность раствора при заданной длине волны, V - обьем навески (мл), m - масса навески (мкг) [25].
Глава 3.