Клонирование гена полинуклеотидкиназы фага Т4
Клонирование гена полинуклеотидкиназы фага Т4 в вектор для экспрессии pET28-b проводили по общепринятой схеме. Полученный ПЦР-продукт обрабатывался эндонуклеазами Paq I и Xho I. Paq I (изошизомер BspH I) узнает сайт 5/-TCATG
A-3/, внутри которого содержится АTG-кодон. Второй кодон гена начинается с аденина и в последовательности гена отсутствуют сайты для Paq I. Таким образом, удалось без каких-либо сложностей клонировать ген pseT в удобном положении относительно последовательности Шайн-Дальгарно. Индукция экспрессии гена Т4 полинуклеотидкиназы представлена на рисунке 7.