Культивирование Pseudomonas sp. 142NF(pNF142)и Rhodococcus sp. S67 в виде монокультур или в смешанной культуре
Штаммы-деструкторы родов Pseudomonas и Rhodococcus значительно различаются по удельной скорости роста, поэтому для получения близких значений количества клеток разных штаммов в смешанной культуре необходимо вносить посевной материал более быстро растущей культуры псевдомонад после инокуляции родококков. В результате подбора времени инокуляции посевной культуры псевдомонад при проведении совместной ферментации указанных микроорганизмов посев штамма Pseudomonas sp. 142NF производили через 12 ч после начала культивирования штамма Rhodococcus sp. S67.
На рисунке 24 представлены кривые роста микроорганизмов в смешанной культуре. Как видно из графиков на рисунке 20, время посева псевдомонад совпало с началом экспоненциальной фазы роста родококков. Следует отметить синхронность достижения стационарной фазы роста обеими культурами; при этом значения численности микроорганизмов обоих штаммов близки,данные об этом приведены в таблице 2.
Таблица 2 - Ферментация штамма Pseudomonas sp. 142NF(pNF142)
|
Ферментация |
Максимальная численность микроорганизмов, КОЕ/мл |
Время культивирования, ч |
Максимальная удельная скорость роста д, ч (час роста) |
Выход сырой биомассы, г КС |
Численность микроорганизмов в КС, КОЕ/мл |
|
Pseudomonas (с салицилатом) |
6,7-109 |
14 |
1,99 (10-й) |
160 |
4,2-10'° |
|
Pseudomonas (сДТ) |
2,1-Ю9 |
23 |
1,76 (10-й) |
136 |
1, 8-10'° |
|
Rhodococcus |
4,9-1010 |
24 |
0,65 (18-й) |
200 |
1,3-1012 |
|
Совместная |
Р.-4,3-108 Rh- 6,3-108 |
26 |
Р.-0,54 (7-й) /8й.-0,44 (15-й) |
208 |
Р.-3,4-10'° Rh- 3,8-10'° |
Рисунок 20 - Кинетика роста штаммов Pseudomonas sp. 142NF (pNF142) (1) и Rhodococcus sp. S67 (2) в смешанной культуре
Как видно из данных таблицы 2, по основным показателям совместная ферментация лишь незначительно уступает раздельному культивированию псевдомонад и родококков, а ее преимущества очевидны: число большинства необходимых технологических операций сокращается почти в два раза. Кроме того, соотношение, равное 1:1, штаммов Pseudomonas sp. 142NF и Rhodococcus sp. S67 в КС можно априори считать эффективным, а их численность (3,4-1010 КОЕ/мл и 3,8-1010 КОЕ/мл, соответственно) достаточно высока для использования в составе жидкой формы биопрепарата.